Servicio de Cromatrografía

La cromatografía es una técnica analítica utilizada para separar, identificar, cuantificar y purificar los componentes de una mezcla, tanto analítica como preparativamente. Se basa en la distribución de las moléculas entre dos fases: una fase estacionaria, que permanece fija, y una fase móvil, que transporta la muestra. La interacción entre el analito y ambas fases determina el tiempo de retención de los analitos y, por tanto, la separación.

Existen distintos tipos de cromatografía según la naturaleza de las fases y/o el mecanismo de interacción. Atendiendo a la naturaleza de las fases tenemos:

• Cromatografía líquida (LC): emplea una fase móvil líquida.
• Cromatografía gaseosa (GC): utiliza una fase móvil gaseosa, ideal para compuestos volátiles y termoestables.

Si consideramos el mecanismo de separación, tendríamos cromatografías de adsorción, partición, intercambio iónico, exclusión por tamaño y afinidad.

El Servicio de Cromatografía del Instituto de Investigaciones Químicas lleva a cabo aplicaciones de muy diversa índole para lo cual tenemos distintos equipos de cromatografía líquida y gaseosa, acoplados a diversos detectores que se detallan a continuación:

Detectores ópticos acoplados a cromatógrafos líquidos:

• Photo Diode Array (PDA). Mide la absorbancia en el rango del UV-Visible, para la detección de compuestos con cromóforos.
• Índice de Refracción (IR). Detecta cambios en el índice de refracción entre la fase móvil y el analito. Es universal pero no compatible con gradientes. Ideal para carbohidratos y polímeros.
• Detector de dispersión de luz evaporativa (ELSD). Mide la luz dispersada por los analitos tras la evaporación del disolvente. Ideal para compuestos sin cromóforos, no volátiles o semi volátiles como lípidos y azúcares.

Detectores acoplados a cromatógrafos de gases:

• Detector de ionización de llama (FID). Mide la corriente generada por la oxidación de compuestos orgánicos en una llama de hidrógeno/aire. Altamente sensible para hidrocarburos y compuestos orgánicos volátiles.
• Detector de conductividad térmica (TCD). Mide la variación de la conductividad térmica del gas portador al pasar el analito. Es universal, aunque con menor sensibilidad que el FID. Ideal para la detección de gases como el H₂, N₂, CO y CO₂.
• Espectrómetro de masas (MS). Separa los analitos en el analizador según su relación m/z. Nos permite determinar el peso molecular de un compuesto orgánico, así como, su determinación estructural. Acoplado a un cromatógrafo se convierte en una técnica muy potente para la caracterización de compuestos, porque combina el poder de separación de la cromatografía con la especificidad de la relación m/z de la espectrometría.

Equipos de cromatografía líquida de alta resolución:

• Dos equipos LC-2030C 3D Plus Shimadzu acondicionados para fase normal y reversa, con:

– Inyección automática con carrusel de muestras con control de temperatura.

– Bomba cuaternaria que puede trabajar hasta 600 bares.

– Horno con válvula de selección de columna.

– Diodo Array UV-Visible. Rango de adquisición de 190 a 800 nm.

• Dos equipos LC Preparativos Shimadzu para fase normal y reversa, con:

– Inyección automática (Autosampler SIL-10AP) o manual.

– Bomba cuaternaria que puede trabajar hasta 150 mL/min en forma isocrática y 100mL/min en gradiente.

– Diodo Array modelo SPD-M40. Rango de adquisición de 190 a 800 nm.

– Colector de fracciones FRC-10A.

El Servicio cuenta con un juego de columnas analíticas de fase reversa con distintas selectividades y con un detector de dispersión de luz evaporativa de baja temperatura ELSD-LT II que se puede acoplar a cualquiera de los dos equipos analíticos de cromatografía liquida de alta resolución anteriormente citados.

• Waters e2625 (GPC).

La cromatografía de permeación en gel es una técnica que separa las moléculas en función de su tamaño hidrodinámico. Esta técnica es fundamental para el análisis de polímeros y proteínas, permitiendo determinar parámetros como la distribución de pesos moleculares promedio y el índice de polidispersidad.

El equipo consta de:

– Inyector automático con carrusel de muestra con control de temperatura.

– Bomba cuaternaria.

– Horno con control de temperatura para la columna.

– Detector índice de refracción modelo W2414.

– Columna Waters Styragel HR4 (THF) 5K-600K.

Equipos de cromatografía de gases:

• GC-2010 Pro (Shimadzu) acoplado a un espectrómetro de masas GCMS-QP2010 Plus (Shimadzu) con:

– Auto inyector AOC-20i.

– Horno de columna con temperatura máxima de trabajo de 450 º C.

– Fuente de ionización con impacto electrónico e ionización química.

– Simple cuadrupolo cuyo rango de adquisición es de 2 a 1090 uma.

• GC-2010 Pro Shimadzu (dual) con:

– Doble auto inyector AOC-20i.

         – Horno de columna con temperatura máxima de trabajo de 450 º C.

– Dos detectores FID en paralelo.

Permite operar en dos líneas analíticas simultáneamente.

• GC-2010 plus (Shimadzu) acoplado a un espectrómetro de masas GCMS TQ-8040 (Shimadzu) con:

– Auto inyector AOC-20i.

– Horno de columna con temperatura máxima de trabajo de 450 º C.

– Fuente de ionización con impacto electrónico.

– Triple cuadrupolo, posibilidad de hacer MS/MS. Rango de adquisición de 2 a 1090 uma.

• GC Agilent 7820A GC System con:

– Inyector G4513A automático.

– Horno de columna con temperatura máxima de trabajo de 425 º C.

– Dos detectores en paralelo: FID y TCD.

• GC Agilent 7820A GC System con:

– Inyector automático G4513A.

– Horno de columna con temperatura máxima de trabajo de 425 º C.

– Dos detectores FID en paralelo.

Usuarios internos

• El análisis será realizado por el usuario, previa formación por parte del personal técnico del Servicio.
• Antes de utilizar cualquier equipo, el usuario debe realizar la reserva con antelación en la aplicación interna del IIQ “Otros equipos”. No se podrá realizar el análisis si el equipo no se ha reservado previamente.
• Las muestras deben estar procesadas, filtradas y correctamente
• Cada usuario es responsable de comprobar los viales/botellas de las disoluciones de lavado de los equipos antes de empezar el análisis. En caso de que fuera necesario deben ser rellenadas o cambiadas.
• Está prohibido modificar parámetros críticos de los equipos sin autorización.
• Todos los equipos tienen su propio cuaderno de incidencias donde el usuario debe indicar su nombre, extensión, las muestras a analizar y cualquier observación o anomalía que considere relevante.
• Cualquier anomalía o incidencia debe ser comunicada al personal técnico.
• Una vez finalizado el análisis, NO se pueden dejar muestras en el equipo.
• Apagar el equipo siguiendo el procedimiento establecido en cada uno de ellos.
• Dejar el área de trabajo limpia y ordenada.

Usuarios externos

• La realización de los análisis lo hará el personal técnico del Servicio de Cromatografía, puede ponerse en contacto a través del correo electrónico
• Las muestras deben venir procesadas, filtradas y perfectamente etiquetadas, con la misma referencia que se haya utilizado en la solicitud.
• Los resultados de los análisis se entregarán por correo electrónico en formato pdf.
• Si se solicita la devolución de muestra, en el plazo de un mes desde la entrega de los resultados, debe ser recogida por el usuario. A partir del mes las muestras podrán ser destruidas.

Tarifas vigentes de los Servicios Científico Técnicos

El personal interno del IIQ, puede solicitar el Servicio haciendo click aquí.

Los usuarios ajenos al IIQ, pueden contactar con el personal responsable para la solicitud del análisis a través del correo electrónico